产品说明
Tth Nucleoside diphosphate kinase是一种热稳定核苷二磷酸激酶,来自于嗜热细菌菌Thermus thermophilus, 该酶不仅催化腺苷三磷酸(ATP)和核苷二磷酸(NDP)之间高能磷酸基团的转移,还具有NDP激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性,并参与转录调控和信号转导。本酶具有很好的耐热性,在最适温度60-75℃范围内,其在细胞内负责合成除ATP以外的其它核糖核苷酸,由核糖核苷二磷酸生成核糖核苷三磷酸:(d)XDP+(d)YTP→(d)XTP+(d)YDP。该酶比活为1×105 U/mg,包装浓度约100 ng/μl。
本公司核苷二磷酸激酶是重组表达,并经多步纯化制备的重组蛋白。
活性定义
1活性单位指在65℃下,1×核苷二磷酸激酶反应缓冲体系下,在10mM ATP、1mM UDP存在条件下,每分钟转化1.0 μmole UDP生成UTP所需酶量。
活性测定条件
1× NDPK Buffer:20 mM HEPES,pH7.5,100 mM Potassium glutamate,10 mM Magnesium acetate,5mM DTT。
浓度:10U/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点
Ø 本酶为热稳定性蛋白,能够耐受70-75℃反应温度
适用范围
Ø 酶法合成各种核苷三磷酸
Ø 蛋白磷酸化
产品包装规格及组成
Component | AE1003A | AE1003B |
核苷二磷酸激酶 | 500U | 2500U |
10 × NDPK Buffer | 0.3ml | 1.5ml |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
20mM Tris-HCl,200mM NaCl,5mM DTT,50% Glycerol,pH7.5
使用实例:
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积或浓度 |
10×Buffer | 2ul |
底物NDP | 2mM |
酶(10U/µl) | 1-2ul |
H2O | X ul |
总体积 | 20ul |
2)60℃×30min反应,
3)HPLC或薄板层析检测产物,或按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 不能完全热失活