产品说明：

Benzonase核酸酶，是一种核酸内切酶，可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，又被称为“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的污染，且无蛋白酶活性残留，核酸酶活性达2×10⁵ U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同时， 也具有多种其他用途，如：减少了样品处理时间，增加了蛋白产量，离心时时沉淀和上清分离的更彻底，更便于溶液的离心（尤其是超滤）；提高色谱纯化的效率等。

本公司Benzonase核酸酶为His标签的Benzonase核酸酶（科研级别），重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在37℃、pH8.0下， 1× Benzonase核酸酶反应缓冲体系下，30 min内使A260 值降低1.0 (相当于完全消化37 μg DNA ) 所需的酶量。

活性测定条件

10 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25°C), 20 mM KCl, 10 mM (NH₄)₂SO₄, 0.01% Tween 20, 1.5 mM MgCl₂.

浓度：250U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与应用

Ø 蛋白提取时去除核酸污染：蛋白提取时有效降解核酸，降低样品粘度，提高蛋白纯度

Ø 与裂解液配合使用，去除样品中核酸，降低样品粘性，利于WB、IP、Co-IP等下游操作

Ø 疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除

Ø 降解核酸，提高蛋白包涵体的质量和纯度

Ø 去除带负电荷的核酸，消除对双向电泳蛋白样品的影响，改善分离效果，增强电泳分辨率

Ø 减少存放的外周血单细胞的结块现象

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

使用实例：

1.小量样本的核酸去除实验

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30-60min反应，

3）75℃×15min失活酶，

4）蛋白电泳。

2. 病毒样本中核酸的去除实验

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30-60min反应，

3）后续病毒纯化操作。

Benzonase抑制剂：

Benzonase在非常广泛的条件下，都能保持很高的稳定性和活性，使其与多种细胞裂解液，如RIPA，或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如：1mM的PMSF不会抑制核酸酶活性，浓度<0.4%的Triton^® X-100对核酸酶活性几乎无影响，<0.4%的脱氧胆酸钠使核酸酶可保持70%的活性，超过该临界值之后核酸酶活性会急剧降低，1%的浓度会使活性丧失70%；0.05%的SDS对核酸酶活性几乎无影响，而SDS浓度在0.1%-1%之间时，核酸酶在变性后活性会急剧降低。另外，核酸酶可耐受6M尿素，当尿素达到7M时，核酸酶在变性后活性会急剧降低。大于100mM的盐酸胍会完全抑制Benzonase活性。1mM的EDTA会部分抑制Benzonase活性，5mM的EDTA会使活性丧失90%，

Benzonase核酸酶的去除：

对于不带标签的Benzonase核酸酶，可通过色谱纯化去除核酸酶。常见的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质，具体的Benzonase去除条件如下表：

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加用量。

l 部分化学成分会抑制benzonase酶活性，详见附表

l 若需从样品中去除benzonase，可利用镍柱或离子交换树脂去除

l 推荐用量

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