产品说明

3173 DNA Polymerase为来源于病毒的热稳定型DNA聚合酶，通过点突变，使其3’-5’外切活性缺失，提高扩增性能。该酶除了具有依赖于DNA的聚合酶活性，还具有依赖于RNA的逆转录活性，因此可用于单管RT-PCR扩增。该酶具有强烈的链置换活性，可用于DNA或RNA的等温扩增。在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。对于有复杂二级结构的RNA模板，可通过92度加热3s来得到好的扩增效果，而Bst pol在此温度加热后导致扩增活性丧失。

该酶搭配两种 Buffer：10×3173 Isothermal Buffer 和 10×AM PCR Buffer。10×3173 DNA Polymerase Buffer用于恒温PCR扩增，其反应温度不能超过70°C。10×AM PCR Buffer 用于常规PCR扩增，94°C预变性时间不可超过5min。

本公司3173 DNA Polymerase是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在65℃下， 1× 3173 DNA Polymerase反应缓冲体系下，30 min内将25 nmol dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量。

活性测定条件

65℃下， 1× 3173 DNA Polymerase反应缓冲体系下，温育30 min。

浓度：5U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点

Ø 同时具有DNA聚合酶活性和反转录酶活性

Ø 耐热性比MMLV逆转录酶显著提高，95度半衰期10分钟

适用范围

Ø 一步法RT-PCR

Ø 高温下的RT-PCR

Ø 高温下的RT-LAMP等温扩增

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.2), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% Nonidet P40, 0.1% Tween 20, and 50% glycerol.

应用实例

1. 以 DNA 为模板进行 PCR 扩增

*DNA template 可参照如下标准（50 μl PCR 体系）：

PCR 反应条件

2. 以 RNA 为模板进行 RT-PCR 扩增

RT-PCR 反应条件

3. 缺刻恒温扩增

55°C 孵育 2~8h

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。