产品说明
DNA错配修复系统(MMR)主要由三种蛋白组成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS负责识别错配或未结合位点并与之结合,随后MutL蛋白与MutS-DNA形成复合体,增强其稳定性,并激活MutH的内切酶活性,协同解旋酶和单链结合蛋白将错配序列切除。 TthMutS蛋白是一种分离自嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)的DNA错配修复蛋白,在最适温度 65-75℃ 范围内,该蛋白具有依赖于DNA的ATPase 活性。 TthMutS蛋白在DNA复制中识别错配碱基和插入碱基形成的Loop结构,其紧密结合Loop结构从而阻止聚合酶的延伸。因此,其可用于错配PCR反应(ARMS-PCR)和基因芯片中,除此外,在基因合成中能阻止错配的产生,降低基因突变率。MutS结合错配碱基对的能力是正确配对碱基对的10-20倍,其中对G/T错配的结合能力最强。
本公司Tth MutS蛋白是在大肠杆菌中重组表达,并亲和纯化的重组大肠杆菌。
浓度:0.5ug/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点和适用范围
Ø 热稳定性MutS,适合高温下的错配DNA聚合酶反应
Ø 去除PCR产物中的错配DNA
Ø 错配DNA检测/SNP检测
Ø 错配DNA富集实验,去除野生型DNA
产品包装规格及组成
Component | AE1182A | AE1182B |
Tth MutS蛋白 | 100ug | 500ug |
10×Tth MutS Buffer | 0.5ml | 1.0ml×2 |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
20mM Tris-HCl,pH7.5,100mM NaCl,1mM DTT,50%甘油
相关产品:
AE1181:Tth mutL
使用实例:
1、错配DNA结合实验
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积/ul |
10×Buffer | 2 |
底物:错配双链DNA | 1-2pmole |
TthMutS (0.5ug/µl) | 1-2 |
H2O | Variable |
总体积 | 20 |
2)37℃×10min反应,
3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果,或按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 需要用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果
l 适合高温下的DNA错配碱基对结合反应,但要确保双链DNA的稳定存在
l mutL的加入对MutS的错配DNA结合活性有一定促进作用