产品说明

本酶为 LATaq DNA 聚合酶，是在Taq酶的基础上进行了基因工程改造，含有一段双链DNA结合蛋白，可以显著提高聚合酶的延伸能力和延伸速度。因此，LATaq DNA聚合酶非常适合于扩增长片段DNA，扩增片段的长度可达 5-8 kb，延伸速度为 3-4 kb/ min（72℃）。本酶是大肠杆菌重组表达的DNA 聚合酶，分子量为 107 kDa。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；无 3’→5’ 外切酶活性。扩增产物具有 3'-dA 尾巴。

活性定义

以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmole 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

浓度：5U/μl

保存条件：-20℃保存特点

Ø 经特殊改造，扩增能力强，4kb/min 延伸条件下可有效扩增 3-5kb 的 DNA 片段；

Ø 酶的热稳定性有一定程度提高，可以采用 98 度 2 分钟预变性；

Ø 可在 60-72 度下进行两步法 PCR，缩短整个 PCR 时间。

Ø PCR 产物具有 3’-dA 尾巴，可直接用于 T/A 克隆；

Ø 可以掺入 dUTP、dITP、荧光标记核苷酸。适用范围

Ø Multiplex PCR

Ø 菌落PCR

Ø TA 克隆 PCR 产物添加 3’-dA

Ø DNA 荧光标记产品包装规格及组成

*附带 2mM dNTP 混合物。质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween

20, and 50% glycerol.

  客户至尊，追求卓越，作酶行业领跑者，助推国产品牌计划

应用举例

注：以下反应举例为 50 μl 标准PCR 体系， 仅供参考。实际 PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

*DNA template 可参照如下标准（50 μl PCR 体系）：

PCR 反应条件

注意事项

l LATaq DNA 聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤。

l 对非热启动酶而言，建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入 PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。

l 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。LATaq DNA 聚合酶的碱基错误率为 1×10^-5。

l 如进行 PCR 扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议提高退火温度，或进行梯度退火， 确定最佳退火温度；同时可以适当减少体系中的 LATaq 酶用量，以增加 PCR 扩增反应的特异性。

l 本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个最优的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl₂/MgSO₄。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。