细胞活力检测试剂盒说明书（AK1001A, AK1001B, AK1001C, AK1001D） 

一. 产品描述Lumi-GlowTM 均质即用型细胞活力检测试剂盒用于定量检测活细胞中 ATP 的含量，从 而间接测定活细胞的数量。该试剂具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点。即用型的 配方减少了先裂解后检测的实验步骤，从而进一步减少了因为频繁加样导致的误差，且其 稳定的辉光信号使该产品尤其适合高通量的肿瘤细胞增殖检测和化合物筛选。

二. 产品组成荧光素酶，荧光素，缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中，四种规格如下 表所示： 目录号 规格 可检测的 96-孔板孔数 可检测的 384-孔板孔数AK1001A 10 ml 100 wells 400 wells AK1001B 50ml 1,000 wells 4,000 wells AK1001C 200 ml 1,000 wells 4,000 wells AK1001D 1000 ml 10,000 wells 40,000 wells

三. 实验步骤1. 细胞活力检测1.1 将对照或待测化合物加到适当的细胞孔中，根据优化的方法培养一定时间1.2 将待测细胞在室温平衡 20 分钟1.3 实验前将 Lumi-GlowTM 细胞活力检测试剂平衡至室温1.4 轻摇混匀试剂1.5 加 100 µl 的试剂到 100 µl 96 孔板细胞中, 或 25 µl 试剂到 25 µl 384 孔板细胞中1.6 用加样枪上下混匀细胞，或在振板机上振荡 2 分钟1.7 如果所用的细胞板为透明的细胞板，立即将细胞转到对应的不透明的白色细胞板里。 如果细胞板是不透明的，则忽略此步骤1.8 将细胞在室温避光孵育 10-15 分钟

注意：虽然信号的半衰期超过 2 小时，我们建议您在加入试剂后 10-15 分钟读板以 取得最好 的线性和信噪比1.9 在适当的 luminescence 读板仪上记录发光信号2. ATP 标准曲线测定2.1 用不含血清的培养基（如 DMEM）将 ATP 二钠稀释到 10 µM 2.2 将 10 µM 的 ATP 进行 10 倍系列稀释，即 ATP 的浓度分别为 10 µM; 1µM; 100 nM; 10 nM; 1 nM; 100 pM; 10 pM; 0 pM 2.3 将上述不同浓度的 ATP 加到不透明的 96 孔板中，每孔 100 µl，每个浓度做复孔。加入ATP 时浓度由低到高，这样可不换吸头2.4 每孔加入 100 µl 的 Lumi-Glow 试剂2.5 用加样枪上下混匀溶液，或在振板机上振荡 2 分钟. 2.6 将测试板在室温避光孵育 10-15 分钟- 注意：虽然信号的半衰期超过 2 小时，我们建议您在加入试剂后 10-15 分钟读板以 取得最好的线性和信噪比2.7 在适当的 luminescence 读板仪上记录发光信号2.8 绘制 ATP 标准曲线

四. 储存条件Lumi-GlowTM 细胞活力检测试剂盒可储存于室温（20℃）1 周; 或 4℃2 个月；或- 20℃ 1 年；或-80℃ 2 年。试剂可耐受超过 10 次的冻融

• 文档1