产品说明

 Ribonuclease R(RNase R) 来源于E.coli，经重组表达多步纯化获得，具有Mg²⁺依赖的3’-5’核糖核酸外切酶，可消化几乎所有线性RNA底物，但不能消化环状RNA(circular RNA)、套索RNA(lariat RNA)、3’突出端<7nt的双链RNA、以及具有复杂高级结构的5S RNA等。其核酸外切酶活性可高效的去除不含二级结构的线性RNA，从而保留富集环状RNA分子，便于后续环状RNA测序等实验。

本公司核糖核酸酶R是重组表达，在去除RNase A的条件下，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在20 mM Tris-HCl（pH7.5），100 mM KCl，0.5 mM Mg²⁺反应缓冲体系下，37℃反应10 min，降解1μg 线状单链RNA所需的酶量。

活性测定条件

20 mM Tris-HCl（pH7.5），100 mM KCl，0.5 mM Mg²⁺反应缓冲体系下，37度消化体外转录的线状单链RNA。

浓度：20U/μl

保存条件：-20℃可保存3年，避免反复冻融

特点与应用

Ø 环状RNA富集研究

Ø 生物样品中环状RNA的富集/线状RNA的去除

Ø 真核基因转录的可变剪接研究

Ø 内含子套索序列的分析和鉴定等

产品包装规格及组成

质量控制

无DNase污染，无其它外切和内切核糖核酸酶污染，经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

50mM Tris-HCl (pH7.5 @25℃), 200mM NaCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% (v/v) Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100。

使用实例：

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30min反应，

3）70℃×15min失活酶，

4）尿素变性PAGE电泳或琼脂糖胶电泳检测酶切产物，或按实验目的进行后续操作。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l RNase R在0.1-1.0mM镁离子浓度下均有活性，需保证体系中镁离子浓度不低于0.1mM；

l 反应体系中不要有EDTA等二价金属离子螯合剂；若存在EDTA，可以额外添加MgCl₂（1分子EDTA螯合6个镁离子），使体系中游离镁离子浓度至少达到0.1mM以上。

l RNase R在较宽的pH下具有活性，但碱性条件下RNA容易降解，因此不建议反应体系pH大于9.0。

l 70℃加热10分钟可使RNase R失活。

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