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Taq MutS蛋白
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Aae MutS蛋白

目录号:AE1186

使用前请仔细阅读说明书

产品说明

DNA错配修复系统(MMR)主要由三种蛋白组成,包括MutSMutLMutH。其中MutS负责识别错配或未结合位点并与之结合,随后MutL蛋白与MutS-DNA形成复合体,增强其稳定性,并激活MutH的内切酶活性,协同解旋酶和单链结合蛋白将错配序列切除。 AaeMutS蛋白是一种分离自嗜热Aquifex aeolicusDNA错配修复蛋白,在最适温度 65-75℃ 范围内,该蛋白具有依赖于DNAATPase 活性。 AaeMutS蛋白在DNA复制中识别错配碱基和插入碱基形成的Loop结构,其紧密结合Loop结构从而阻止聚合酶的延伸。因此,其可用于错配PCR反应(ARMS-PCR)和基因芯片中除此外,在基因合成中能阻止错配的产生,降低基因突变率。MutS结合错配碱基对的能力是正确配对碱基对的10-20倍,其中对G/T错配的结合能力最强。

本公司AaeMutS蛋白是在大肠杆菌中重组表达,并亲和纯化的重组大肠杆菌。该酶热稳定性极好,半衰期高于40min,完全满足PCR应用。

浓度:0.5ug/μl

保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融

特点和适用范围

Ø 热稳定性MutS95度半衰期40min 

Ø 去除PCR产物中的错配DNA

Ø 错配DNA检测/SNP检测

Ø 错配DNA富集实验,去除野生型DNA

Ø 用于PCR,提高扩增特异性和忠实性

产品包装规格及组成

Component

AE1186A

AE1186B

Aae MutS蛋白

100ug

500ug

10×Aae MutS Buffer

0.3ml

1.0ml

质量控制

经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20mM Tris-HClpH7.5100mM NaCl1mM DTT50%甘油


相关产品:

AE1187 Aae mutL


使用实例:

1、错配DNA结合实验

1按下表配制反应体系

反应组分 

体积/ul

10×Buffer

2

底物:错配双链DNA

1-2pmole

AaeMutS (0.5ug/µl)

1-2

H2O

Variable

总体积

20

237-65×10min反应

3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果,或按实验目的进行后续操作。

2、提高PCR忠实性和特异性

1按下表配制反应体系

反应组分 

体积/ul

10×PCR Buffer

5

引物F10uM

1-5

引物R10uM

1-5

DNA template

1-100ng

dNTP2mM

5

Taq 酶或高保真聚合酶

2.5U

AaeMutS (0.5ug/µl)

2

H2O

Variable

总体积

50

2PCR反应

3)琼脂糖电泳检测PCR产物

 

警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。


注意事项

需要用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果

适合高温下的DNA错配碱基对结合反应,但要确保双链DNA的稳定存在

mutL的加入对MutS的错配DNA结合活性有一定促进作用


Taq MutS蛋白
Taq MutS蛋白

0.5mg