

Aae MutS蛋白 | 目录号:AE1186 | 使用前请仔细阅读说明书 |
产品说明
DNA错配修复系统(MMR)主要由三种蛋白组成,包括MutS、MutL和MutH。其中MutS负责识别错配或未结合位点并与之结合,随后MutL蛋白与MutS-DNA形成复合体,增强其稳定性,并激活MutH的内切酶活性,协同解旋酶和单链结合蛋白将错配序列切除。 AaeMutS蛋白是一种分离自嗜热细菌(Aquifex aeolicus)的DNA错配修复蛋白,在最适温度 65-75℃ 范围内,该蛋白具有依赖于DNA的ATPase 活性。 AaeMutS蛋白在DNA复制中识别错配碱基和插入碱基形成的Loop结构,其紧密结合Loop结构从而阻止聚合酶的延伸。因此,其可用于错配PCR反应(ARMS-PCR)和基因芯片中。除此外,在基因合成中能阻止错配的产生,降低基因突变率。MutS结合错配碱基对的能力是正确配对碱基对的10-20倍,其中对G/T错配的结合能力最强。
本公司AaeMutS蛋白是在大肠杆菌中重组表达,并亲和纯化的重组大肠杆菌。该酶热稳定性极好,半衰期高于40min,完全满足PCR应用。
浓度:0.5ug/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点和适用范围
Ø 热稳定性MutS,95度半衰期40min
Ø 去除PCR产物中的错配DNA
Ø 错配DNA检测/SNP检测
Ø 错配DNA富集实验,去除野生型DNA
Ø 用于PCR,提高扩增特异性和忠实性
产品包装规格及组成
Component | AE1186A | AE1186B |
Aae MutS蛋白 | 100ug | 500ug |
10×Aae MutS Buffer | 0.3ml | 1.0ml |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
20mM Tris-HCl,pH7.5,100mM NaCl,1mM DTT,50%甘油
相关产品:
AE1187: Aae mutL
使用实例:
1、错配DNA结合实验
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积/ul |
10×Buffer | 2 |
底物:错配双链DNA | 1-2pmole |
AaeMutS (0.5ug/µl) | 1-2 |
H2O | Variable |
总体积 | 20 |
2)37-65℃×10min反应,
3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果,或按实验目的进行后续操作。
2、提高PCR忠实性和特异性
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积/ul |
10×PCR Buffer | 5 |
引物F(10uM) | 1-5 |
引物R(10uM) | 1-5 |
DNA template | 1-100ng |
dNTP(2mM) | 5 |
Taq 酶或高保真聚合酶 | 2.5U |
AaeMutS (0.5ug/µl) | 2 |
H2O | Variable |
总体积 | 50 |
2)PCR反应,
3)琼脂糖电泳检测PCR产物。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 需要用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA结合结果
l 适合高温下的DNA错配碱基对结合反应,但要确保双链DNA的稳定存在
l mutL的加入对MutS的错配DNA结合活性有一定促进作用