该 Topoisomerase I 来源于牛痘病毒（vaccinia virus），通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构，除此外其能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的 5’-OH 基团后，重新连接形成完整DNA链。因此，使用该酶可作为DNA的连接有效工具。其可用于DNA的载体连接、缺刻修复、接头连接等实验。

本公司牛痘病毒-拓扑异构酶（Topoisomerase I ）是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1单位（约1 f mol）指在37°C条件下，1h内使1 μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。

活性测定条件

1×牛痘TOPOI Buffer：50 mM Tris-acetate (pH7.5)，100 mM NaCl，2.5 mM MgCl2。 

浓度：20U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

适用范围

Ø  Topo克隆法构建载体

Ø  缺刻修复

Ø  接头连接

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl，35 mM (NH₄)₂SO₄，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA ，50% Glycerol，pH 7.5@ 25°C。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l  80℃ 20min可使该酶失活。

l  该酶切割偶联试验时，识别位点[5’C(T)CCTT↓]的3’端碱基数量影响偶联效率。

l  酶-DNA共价复合物形式进行DNA分子连接时，底物5’-端需要保留-OH基团。

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