产品说明

Alkaline Phosphatase (Shewanella) (ShAP) 催化磷酸单酯的水解，但不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解。通过70℃热处理15分钟，可使本酶不可逆失活。

本公司Alkaline Phosphatase (Shewanella)是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1活性单位指在37℃、pH9.8的条件下， 1×Alkaline Phosphatase (Shewanella)反应缓冲体系下，1分钟内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate) 生成1 μmol的对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需要的酶量。

活性测定条件

活性定义反应液组成：1 M Diethanolamine，10 mM p-nitrophenyl phosphate，0.5 mM MgCl₂，pH9.8

浓度：1U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与应用

Ø 碱性磷酸酶显色反应，包括酶联免疫检测显色等。

Ø 与Exonuclease I合用，对PCR产物进行测序前处理。注意：不建议对用于连接反应的载体进行末端去磷酸化处理，如有此类需求，请根据实际情况选择AE1802A/B、AE1803A/B、AE1807A/B。

Ø 去除DNA分子的5’磷酸基团。

Ø 20-60℃均有活性。

Ø 70℃加热处理15分钟，可使本酶不可逆失活。

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM MgCl₂，0.1 mM ZnCl₂，50% Glycero，pH8.0

使用实例：

用于 PCR 产物测序前的处理。

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30min反应，

3）70℃×15min失活酶，

4）分取上述反应液1μl～2μl，必要时最多5μl，进行后续的测序反应。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 2 units的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

l 2 units的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

l 活性显著高于大肠杆菌碱性磷酸酶，约为1500U/mg。

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