产品说明

虾碱性磷酸酶（rSAP）是热敏感的重组碱性磷酸酶，rSAP 与野生型酶一样，不包含任何亲和标签或其他修饰。rSAP 非特异性的催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，rSAP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。rSAP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。rSAP 也可以用来处理 PCR 反应中的 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。rSAP 在 65℃ 温育 5 分钟即可完全、不可逆失活，因此，在连接或末端标记之前，可以不用去除 rSAP。

本公司rSAP是重组表达的北极虾（Pandalus borealis）碱性磷酸酶，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1 单位是指 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下水解 1 μmol 对硝基苯酚磷酸盐 pNpp所需的酶量。

活性测定条件

1X反应缓冲液：50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac）2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃），37℃ 温育。

浓度：1U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与应用

l DNA 和 RNA 的去磷酸化

l 克隆载体去磷酸化，防止载体自连

l 测序或 SNP 分析前除去 PCR 反应中dNTP 和焦磷酸盐

l T4 PNK 标记 5´ DNA 末端前的去磷酸化

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM MgCl₂，0.1 mM ZnCl₂，50% Glycero，pH8.0

使用实例：

用于 PCR 产物测序前的处理。

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30min反应，

3）70℃×15min失活酶，

4）分取上述反应液1μl～2μl，必要时最多5μl，进行后续的测序反应。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 活性显著高于大肠杆菌碱性磷酸酶。

l 热失活：65℃ 温育 5 分钟。

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