

产品说明
热稳定Alkaline Phosphatase催化磷酸单酯键的水解,但不能催化磷酸二酯键以及磷酸三酯键的水解。本酶属于高温酶,在60-100度活性高,不能通过加热进行失活。本酶比活性约20U/mg。
本公司热稳定Alkaline Phosphatase 是重组表达,并经多步纯化制备的重组蛋白。
活性定义
1活性单位指在75℃下, 1× Alkaline Phosphatase反应缓冲体系下,1分钟内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate) 生成1 μmol的对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需要的酶量。
活性测定条件
活性定义反应液组成:1 M Diethanolamine,pH11,2 mM MgCl2,75度温育。
浓度:0.1U/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点与应用
Ø 去除DNA分子的5’磷酸基团
Ø 与Exonuclease I合用,对PCR产物进行测序前处理。
产品包装规格及组成
Component | AE1806A | AE1806B |
热稳定Alkaline Phosphatase | 10U | 50U |
热稳定Alkaline Phosphatase Buffer | 0.3ml | 1.5ml |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl,100 mM KCl,1 mM MgSO4,50% Glycerol,pH8.0
注意事项
l 0.2 units的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
l 0.2 units的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
使用实例:
1)按下表配制反应体系
反应组分 | 体积或浓度 |
10×Buffer | 2ul |
底物 | 0.5-10ug |
酶(0.1U/µl) | 1-2ul |
H2O | Xul |
总体积 | 20ul |
2)75-85℃×60min反应,
3)酚氯仿抽提DNA,除去热稳定碱性磷酸酶,
4)按实验目的进行后续操作。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。
注意事项
l 0.2 units的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
l 0.2 units的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。