产品说明

快速 CIP是重组表达的热敏小牛肠碱性磷酸酶（CIP），催化DNA和 RNA 5´和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，快速CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。快速 CIP 在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以快速作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端，反应时间仅需 10 分钟。快速 CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP分析。与野生型 CIP 相比，快速 CIP 在 80°C 加热 2 分钟即可 100%不可逆热失活，无需加入任何其他试剂如镁离子、EDTA 等。因此在连接或者末端标记前无需纯化处理。

本公司热敏小牛肠碱性磷酸酶（CIP）是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

1 单位指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐pNpp水解成对硝基苯酚所需的酶量。

活性测定条件

活性定义反应液组成：50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac）2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃），37℃ 温育。

浓度：5U/μl

保存条件：-20℃可保存2年，避免反复冻融

特点与应用

l 快速且不可逆的热失活，节省纯化步骤。

l 稳定性优于野生型酶。

l 快速 CIP 反应时无需加入锌等额外添加剂，反应时间仅需10分钟。

l 反应条件灵活，兼容任何限制性内切酶缓冲液，无需纯化。

l 活性更高，所需酶量更少，降低单次反应成本。

l 无需备有多个磷酸酶，快速CIP可去除DNA、RNA和dNTPs的5'和3'磷酸。

l 降解 PCR 产物中未掺入的 dNTP，提高 DNA 测序和 SNP 分析质量。

产品包装规格及组成

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM MgCl₂，0.1 mM ZnCl₂，50% Glycero，pH8.0

使用实例：

用于 PCR 产物测序前的处理。

1）按下表配制反应体系

2）37℃×30min反应，

3）80℃×5min失活酶，

4）分取上述反应液1μl～2μl，必要时最多5μl，进行后续的测序反应。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 活性显著高于微生物碱性磷酸酶。

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