产品说明

Bsu DNA polymerase KF为Bsu DNA 聚合酶的大片段，保留了芽孢杆菌（Bacillus subtilis）DNA聚合酶A的 5´→3´ 聚合酶活性，但是缺失了5´→3´ 核酸外切酶结构域，该大片段自身缺失 3´→5´ 核酸外切酶活性。该酶因缺失了5´→3´ 核酸外切酶活性，具有很强的链置换合成活性。

本公司Bsu DNA polymerase KF为重组表达，并经多步纯化的芽孢杆菌（Bacillus subtilis）DNA 聚合酶A基因的大片段。 

活性定义

一个单位被定义为在37℃下30 min内将10 nmol dNTP掺入酸不溶性物质的酶量。

活性测定条件

1×AM Buffer B，37℃温育

浓度：5U/μl

保存条件：-20℃保存

特点

Ø 很强的链置换合成能力

Ø 无切口平移活性

Ø 热失活：75℃×20min。

适用范围

Ø RPA等温DNA扩增

Ø 链置换的 DNA 合成

Ø 随机引物法标记

Ø cDNA 第二条链的合成

Ø 单个 dA 的加尾

产品包装规格及组成

质量控制

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

酶贮存缓冲液

 50 mM Tris-HCl，50 mM KCl ，1 mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.5@ 25°C。

相关产品

和AE1904: T4 gene 32（T4 SSB），AE1652：T4 uvsY recombination protein，AE1651 T4 uvsX recombinase，一起进行RPA等温DNA扩增反应

应用实例

1. 第二链cDNA合成

1）按下表配制反应体系

2) 加入1ul Bsu DNA polymerase 大片段（5U/ul），37℃保温30min；

3) 跑胶检测第二链cDNA延伸效果结果

按需进行后续实验。

警告: 本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

注意事项

l 由于缺乏3 ´ → 5 ´ 核酸外切酶活性，Bsu DNA聚合酶大片段不能切除 3´ 未配对的突出末端，因而不适用于生成平齐末端。

l 25℃ 时Bsu DNA聚合酶大片段保留了全长聚合酶的50%活性，是同温度下Klenow片段（3´-5´ exo-）的两倍。

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