

产品说明
Sau DNA聚合酶大片段,来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),缺少Staphylococcus aureus DNA聚合酶Sau PolI基因的前293个氨基酸。该酶保留了Sau PolI的5´-3´聚合酶活性,但5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性缺失,可用于重组酶扩增。
本公司Sau DNA Polymerase (Large Fragment)是重组表达,并经多步纯化制备的重组蛋白。
活性定义
1活性单位指在37℃下,1× Sau Buffer反应缓冲体系下,30 min内将10 nmol dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量。
活性测定条件
1× Sau PolI Buffer:10 mM Tris-HCl pH7.5,50 mM NaCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT,37℃温育。
浓度:5U/μl
保存条件:-20℃可保存2年,避免反复冻融
特点与适用范围
Ø cDNA第二条链的合成
Ø 单个dA的加尾
Ø 链置换的DNA合成
产品包装规格及组成
Component | AE0612A | AE0612B |
Sau DNA Polymerase (Large Fragment) | 250U | 1250U |
10× Sau PolI Buffer | 0.2ml | 1.0ml |
质量控制
经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl(pH 8.0),50 mM KCl,1 mM DTT,50% Glycerol
注意事项
l Sau DNA聚合酶大片段无5´-3´外切酶活性,因此不能进行切口平移反应
l 在重组酶扩增中功能类似Bsu DNA polymerase大片段,因此二者理论上可以相互替代
应用实例
第二链cDNA合成
1)按下表配制反应体系
反应组分 | ul |
10× Buffer | 5 |
10mM dNTP | 2 |
primer (100μM) | 2 |
模板cDNA | 100ng |
H2O | Up to 50 |
2) 加入1ul Sau DNA polymerase 大片段(5U/ul),37℃保温30min;
3) 跑胶检测第二链cDNA延伸效果结果。
按需进行后续实验。
警告: 本产品仅限科研实验使用,临床应用安全性和有效性未鉴定,不可用于医疗临床诊断。